효율적인 효소 고정 및 회수를 위한 온도 반응형 HRP 나노캡슐

Wei Wei ,  

Juan-juan Du ,  

Ming Yan ,  

Jun-rong Yu ,  

Lei Chen ,  

Zu-ming Hu ,  

摘要

고추냉이 과산화효소(horseradish peroxidase, HRP)를 목표 단백질로 하고 N-이소프로필 아크릴아미드(NIPAM)를 단량체로 하여 현장 침전 중합법으로 37 ℃에서 NIPAM과 HRP의 질량비를 6:1로 조건하에 입자 크기 13.7 nm, 제타 전위 (-3.7 ± 0.3) mV의 온도 반응형 고추냉이 과산화효소 나노캡슐(nHRP)을 제조하였다. 기질 보조 레이저 탈착 이온화 비행 시간 질량 분석기(MALDI-TOF MS), 투과 전자 현미경(TEM), 동적 광 산란기(DLS), 자외선-가시광선 분광 광도계(UV-Vis) 등을 사용하여 HRP의 수정도, nHRP의 미세 구조, 입자 크기, 촉매 활성, 온도 반응성 및 열 안정성을 특성화하였다. 연구 결과, 제조된 고추냉이 과산화효소 나노캡슐의 단분산성이 양호하며; 주변 온도가 33 ℃를 초과할 때 nHRP가 반응 변화를 나타내고 입자 크기 변화가 뚜렷하며 가역적임; nHRP는 HRP 원효소에 비해 열 안정성이 현저히 향상되었으며; 50 ℃에서 nHRP를 고속 원심분리하면 효소를 여러 번 효과적으로 분리 및 회수할 수 있다.

关键词

온도 반응; 나노캡슐; N-이소프로필 아크릴아미드; 효소 고정; 효소 회수

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